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高通量组织研磨仪样品研磨参数

2018-7-22??????浏览:

1、DNA提取

组织

研磨珠规格与数量

频率

时间

建议溶液

植物组织

2-3粒小号或者1粒大号

60Hz

40-90

TPS液,不容易起泡

心、肾、肌肉

1粒大号加2粒小号

65Hz

60

 

胃、肠、肺

1粒大号加2粒小号

65Hz

90-120

可以变化大小号珠子,研磨更彻底

肝、脑、脾

1-2粒小号

60Hz

45-60

 

皮肤、脂肪

2粒大号加1粒小号

65Hz

80-90

 

血管

1-2粒小号(如果加入适当石英砂,效果更佳)

60Hz

60


2、RNA提取

组织

研磨珠规格与数量

频率

时间

建议溶液

植物组织

2-3粒小号或者1粒大号

60Hz

40-90

Trizol

心、肾、肌肉

1粒大号加2粒小号

65Hz

60

Trizol

胃、肠、肺

1粒大号加2粒小号

65Hz

90-120

Trizol

肝、脑、脾

1-2粒小号

60Hz

45-60

Trizol

皮肤、脂肪

2粒大号加1粒小号

65Hz

80-90

 

血管

1-2粒小号(如果加入适当石英砂,效果更佳)

60Hz

60

Trizol

3、蛋白质提取

蛋白质提取时,最好频率设定在60Hz,研磨时间较RNA提取研磨时间延长30秒左右,具体的研磨时间需要看研磨的组织量和类型而定。

a、容易研磨的如:肝、脑、脾,用2-33mm柱子,研磨45秒;

b、较难研磨的如:心、肾、肌肉,用2ml离心管,放入4mm以上的大珠子1-2粒,加3mm的小珠子1-2粒,研磨60秒。研磨时,加入提取液。

液氮研磨

需要特别低温的(做酶活实验),或者较难研磨的样品(植物根、茎、皮肤、骨头、毛发等)可以试用2ml的管子,加入1-26mm珠子,加入样品后(样品剪成1-2mm左右的小块),将管子盖严,放入液氮中冷冻60秒,在60Hz研磨15-30秒即可。如果研磨效果不理想,可再冷冻一次,重复上诉实验步骤即可。(研磨小鼠和尾巴可见具体实验案例)。

工作设定:定时器示意

1)SET设定值设定:可设定频率和时间按左右方向键个,十,百,仟位加或直接按.下面数字键选择.      

2)设定好频率之后..ENT键确认.向下继续设计时间.ENT键确认.

3)时间设好之后。按ENT。保存。退出SET设置界面。